Evaluación de la estabilidad del extracto estandarizado de Caesalpinia spinosa “P2Et” bajo condiciones de estrés inducido

Abstract

El P2Et es un extracto estandarizado a partir de Caesalpinia spinosa que se encuentra en proceso de investigación debido a su potencial terapéutico contra el cáncer de mama. Dado a que el extracto está en la fase II de estudios clínicos dentro del marco del Programa Colombia Científica-GAT, para fines de registro y comercialización se requieren estudios adicionales sobre algunas características químicas del mismo, por lo que se hace necesario llevar a cabo pruebas de estabilidad. Algunas pruebas exigidas por las entidades regulatorias tales como ensayos de estabilidad acelerada e intermedia ya han sido realizadas. Por su parte, los estudios de estabilidad en condiciones de estrés tienen como fin analizar y establecer situaciones extremas bajo las cuales la degradación de un compuesto será evidenciable en un lapso corto. En este estudio, el P2Et fue sometido a cinco diferentes condiciones; oxidación, refrigeración, hidrólisis neutra, hidrólisis ácida e hidrólisis básica. El efecto de cada una de estas condiciones fue determinado mediante la comparación de las áreas bajo la curva de tres marcadores analíticos presentes en el extracto (metil galato, etil galato y ácido gálico), las cuales fueron calculadas antes y después de ser expuesto a cada una de las condiciones usando como técnica analítica la Cromatografía Líquida de Ultra Eficiencia acoplada a Detector por Arreglo de Diodo (UPLC-DAD). Del mismo modo y con fines comparativos, los estándares comerciales de cada uno de los marcadores fueron sometidos a los mismos procesos. Mediante los ensayos de estabilidad bajo condiciones de estrés, se pudo establecer que el extracto se clasificó tentativamente como prácticamente estable en hidrólisis neutra, muy lábil en hidrólisis básica y ácida, y muy estable en condiciones de oxidación. En el caso del ensayo de refrigeración, fue posible evidenciar una disminución en el área del ácido gálico y un aumento con respecto al control en el área del metil galato y el etil galato. Adicionalmente, al realizar un análisis del extracto por Cromatografía Líquida de Ultra Eficiencia acoplada a Espectrometría de masas y analizador Triple Cuadrupolo, cuando este fue sometido a la tercera condición de hidrólisis básica, se determinó la presencia de una nueva señal la cual presentó una m/z de 495 posiblemente perteneciente a Ácido 3,5-di-O-galoilquínico o Acido 1,3-digaloilquinico.