Uso de vectores lentivirales para mediar la transfección del gen de la enzima n-acetil-galactosamina -6-sulfato-sulfatasa en células en cultivo

Abstract

La enfermedad de Morquio A (MPS IVA) es un desorden autosómico recesivo producido por la alteración en la actividad de la enzima N-acetilgalactosamina-6-sulfato sulfatasa (GALNS), llevando a la acumulación intralisosomal de los glicosaminoglicanos (GAGs) queratán sulfato y condroitín 6 sulfato, principalmente en cartílago y córnea. Actualmente no existe un tratamiento específico para los pacientes con MPS IV A, por lo cual es importante evaluar diferentes estrategias para el desarrollo de una terapia segura y efectiva para estos pacientes. En el presente trabajo se evaluó la efectividad en la entrega del material genético por parte de vectores lentivirales y adenoasociados (AAV) en células HEK293. Los resultados mostraron que los vectores lentivirales, produjeron un aumento en la actividad enzimática de hasta 3,1 veces más en los lisados celulares y 5,2 veces en los medios de cultivo con respecto a los valores del control negativo, lo que los hace buenos candidatos para terapia génica en Moquio A. Por otra parte, los vectores AAV mostraron un aumento en la actividad hasta 2,1 veces más tanto en el lisado celular como en el medio. En presencia de SUMF1 la actividad alcanzó fue 1,9 y 44,5 veces más alto en el lisado celular y el medio de cultivo en comparación con el control negativo. Este es el primer ensayo in vitro para MPS IVA en el que se pone en evidencia la posibilidad de hacer uso de vectores lentivirales para el desarrollo de una estrategia de terapia génica para esta enfermedad.