Se optimizó un protocolo para la extracción de ADN genómico de Pinus tecunumanii
basado en el método de extracción de Doyle y Doyle (1990). Se probaron los
megagametofitos de las semillas de árboles de P. tecunumanii muestreados en cinco
poblaciones naturales de Nicaragua. El método consta de maceración del tejido en
tubos Eppendorf, una extracción con bromuro trimetil amonio de cetilo (CTAB)
empleando altas concentraciones de sales, proteinasa K, extracciones sucesivas con
cloroformo-alcohol isoamílico y un tratamiento con ARNasa A. El rendimiento
fue aproximadamente 13 µg de ADN por 58.7 mg de tejido inicial fresco. El ADN
genómico obtenido por este método fue apropiado para ser usado en reacciones
RAPD (ADN polimórfico amplificado al azar).
