Establecimiento de las condiciones optimas de crecimiento del hongo Ampelomyces quisqualis a escala de laboratorio

Abstract

En este trabajo de investigación se probaron dos medios ricos en carbohidraros para la producción a escala de laboratorio del hongo controlador biológico Ampelomyces quisqualis; variando las condiciones de pH y agitación. En la primera etapa de este estudio se realizó la recuperación del hongo a partir de un liofilizado de hojarasca proveniente de la Sabana de Bogotá en el cual se encontraban Alternaria, Aspergillus y Penicilliun entre otros géneros así como diversidad de bacterias Gram positivas y Gram negativas y levaduras; posteriormente se aisló en PDA y extracto de malta. La adaptación del hongo se realizó en los medios a evaluar: Papa-glucosa y Maltafix?, este último es un suplemento alimenticio muy rico en carbohidratos, vitaminas y proteínas. La segunda etapa consistió en realizar el perfil cinético patrón del hongo, utilizando caldo extracto de malta.,adicionado con L-asparagina y antibióticos (estreptomicina y ambramisina), utilizando un volumen total de fermentación de 100 ml Si bien la bibliografía de la ecología y metabolismo de A. quisqualis es muy escasa, se encontró un reporte en el cual utilizaban tal medio para el aislamiento del hongo. Los preinóculos se produjeron en una agitación de 200 r.p.m y pH 6.5. Después de 12 días, se procedió a dar inicio a la fermentación utilizando dos tratamientos diferentes, 1,) oscuridad/luz y 2.) luz/luz. El proceso de fermentación tuvo una duración de 16 días para los dos tratamientos durante los cuales se realizaron recuentos de conidias con cámara de Neubauer, obteniéndose el mayor recuento en el tratamiento 1 (35x106 conidios/ml). Los dos tratamientos se realizaron por triplicado y la toma de muestra se varió en cada réplica cada 6, 12 y 24 horas respectivamente estandarizándose cada 24 horas. La elección del mejor sustrato se desarrolló siguiendo los parámetros de la curva patrón (pH 6.5 y 200 r.p.m). El mejor recuento se presentó en el medio papa-glucosa (50x108 conidios/ml). La evaluación de los parámetros de crecimiento se realizaron en este medio. Los valores de pH que se estudiaron fueron 6.5, 5.5,5.8,7.5 a dos diferentes agitaciones, 250 y 150 r.p.m. Con base en estos ensayos, estableció que el mejor pH para la producción a escala de laboratorio de A. quisqualis es 6.5 y que la mejor agitación es 200 r.p.m, condiciones en las cuales se presentó el recuento más alto (50x108 conidios/ml).