Objetivo. Este trabajo se realizó con el fin de determinar la concentración de inóculo para el crecimiento de Clostridium acetobutylicum ATCC 824 durante una fermentación ABE, empleando un biorreactor discontinuo a escala laboratorio. Materiales y Métodos. Para determinar la concentración inicial de inóculo se realizaron tres experimentos, uno de ellos con porcentaje de inóculo del 5%, otro con 10% y finalmente uno con 15%. Se realizaron tres replicas por experimento. El tiempo de la fermentación fue 24 horas y se tomaron muestras cada 2 horas por duplicado. Luego, se determinó la formación de biomasa por densidad óptica utilizando un espectrofotómetro marca Shimadzu UV-1800, a una longitud de onda de 490 nm. El consumo de glucosa se determinó con el test de glucosa- oxidasa. La cuantificación de los productos obtenidos se llevó a cabo por la técnica HPLC, empleando una columna HPX - 87H con un detector de índice de refracción a las siguientes condiciones: fase móvil ácido sulfúrico 0,5mM a una temperatura de 30°C y un flujo volumétrico de 0,5 mL/min. Resultados. Las concentraciones de biomasa, glucosa y productos se determinaron para los tres experimentos, encontrándose valores más altos para el tratamiento del 15 % de inóculo. Con base a estos valores se calcularon los parámetros de la cinética de Orden 1 (velocidad especifica de crecimiento y tiempo de duplicación) y de Orden 0 (K0 y tiempo de duplicación), rendimiento biomasa-sustrato (Yx/s), rendimiento producto-sustrato (Yp/s) y productividad del proceso. Conclusión. Aunque los valores obtenidos de los parámetros cinéticos de los experimentos de 5%, 10% y 15% de inóculo son muy similares entre sí. El experimento de 15% de inóculo presentó un mayor consumo de sustrato, mayor productividad y mayor concentración final del butanol.