Diseño y construcción de una estación de ultrafiltración para separación de proteínas/ Design and manufacture of an ultrafiltration unit for protein purification

Abstract

RESUMEN La separación de moléculas se puede realizar basándose en diferentes características propias. Dentro de los procesos que se utilizan para este propósito están la extracción química,la cromatografía, la electrofóresis, la ultracentrifugación y la ultrafiltración. La ultrafiltración logra la separación de los elementos de una muestra mediante el uso de membranas semipermeables con un tamaño de poro específico permitiendo que los elementos contenidos en un solvente apropiado sean mantenidos dentro del medio o eliminados del mismo dependiendo del tamaño de la molécula y el tamaño del poro de la membrana de filtración. Para poder aplicar esta técnica se necesita un cartucho de ultrafiltración, una bomba peristáltica, un agitador magnético, un reservorio para la muestra y dos manómetros. Resumiendo,la muestra se coloca dentro de lreservorio y con una bomba peristáltica se impulsa hacia el interior del cartucho de filtración dentro del cual la membran acumple con su función. La bomba peristáltica emplea rodillos que presionan una manguera elástica sobre una superficie dura moviendo la solución en ella contenida sin contaminarla. El agitador homogeneiza la solución que se mantiene circulando entre el reservorio y e lcartucho. El objetivo del proyecto fue construir una estación de ultrafiltración para separación de proteínas que constade: bomba peristáltica, agitador magnéticoy reservorio (que incluye loscontroles de presión y los conectorespara el cartucho de filtración), para con ella ayudar en la purificación de BMP7de dentina humana. La estación cumpli ócon el propósito mencionado.ABSTRACT Molecule separation can be done onthe base of different individua lcharacteristics. Some of the processesused for this purpose include chemica lextraction, chromatography, electrophoresis,ultracentrifugation andultrafiltration. Ultrafiltration separate sthe different elements in a samplesolution by means of a semi permeablemembrane with a specific pore sizeallowing the elements to be retainedwithin the media or eliminated from it depending on the size of the molecule and of the filtration membrane pore. Inorder to apply this technique anultrafiltration cassette containing thefiltration membrane, a peristaltic pump,a magnetic agitator, a reservoir andtwo pressure gauges are needed. Insummary, the sample is placed inside the reservoir, and by means of a peristaltic pump is driven into the ultrafiltration cassette whose membrane separates the molecules insolution. The peristaltic pump employsrollers that press an elastic tubingagainst a hard surface moving thesolution contained within withoutcontaminating it. The magnetic agitatorhomogenizes the solution that is keptcirculating between the reservoir and the filtration cassette. The purpose of this project was to build an ultrafiltration station for protein separation consisting of: a peristaltic pump, amagnetic agitator, and a reservoir(containing the pressure gauges andthe connectors for the filtration cassette)to aid in the purification process ofBMP 7 extracted from human dentine.The station complied with this purpose.