Diseño de un medio de cultivo de menor costo para la producción a escala de laboratorio de la lacasa recombiannte POXA 1B de Pleurotus ostreatus en Pichia pastoris

Abstract

Las lacasas tienen gran importancia a nivel industrial debido a su alto potencial oxidativo e inespecificidad de sustrato, lo que permite su uso en procesos como el tratamiento de aguas residuales. El objetivo de este trabajo fue diseñar un medio económico para la producción de la lacasa rPOXA 1B de Pleurotus ostreatus en Pichia pastoris a escala de laboratorio. Se utilizaron dos Diseños Centrales Compuestos (DCC) con materias primas económicas con el fin disminuir los costos y producir enzima recombinante. La interacción de las variables mostró que la actividad lacasa máxima fue obtenida a las 168 horas (8771.605 ± 155.12 UL-1) cuando la concentración de glucosa USP, proteína de soya, extracto de malta, (NH4)2SO4, cloranfenicol y CuSO4 fue de 20, 40, 11.74, 4.72, 0.1 gL-1 y 1mM respectivamente. La concentración obtenida para las variables (medio de cultivo de menor costo mejorado) fueron más altas en comparación a las previamente establecidas en el medio mejorado. La aplicación de la Metodología de Superficie Respuesta (MSR) resultó en un aumento del 69.94% de la actividad lacasa en comparación con el medio sin optimizar y 11.73% superior a la obtenida anteriormente en biorreactor de 10 L (VET 60%), además, se obtuvo una reducción de costos de 90.28% y una disminución del valor de la unidad enzimática por litro de medio (UL-1) de 91.43%, en comparación al medio previamente mejorado.